病理實(shí)驗(yàn)看似簡(jiǎn)單,實(shí)際上稍不注意細(xì)節(jié),使用
組織切片機(jī)就會(huì)漏洞百出,不同組織如何保存?不同切片有何區(qū)別?刀法需要慢慢練,但該避的坑你不能不懂!
今天遠(yuǎn)湘生物匯總了那些關(guān)于組織切片機(jī)進(jìn)行病理切片的問(wèn)題,看小編如何搞定這些實(shí)驗(yàn)難題。
一、組織如何保存?
普通病理用固定液(多聚甲醛)保存;免疫組化、免疫熒光實(shí)驗(yàn)不宜固定時(shí)間太久。
二、不同組織都用一個(gè)脫水流程嗎?
不同組織,其結(jié)構(gòu)不同,脫水流程也有是區(qū)別的
三、石蠟包埋切片一般切的厚度是多少?冰凍切片切多厚?
冰凍切片厚度為6-10um;石蠟切片為4-6um。
四、冰切出現(xiàn)裂痕的原因?
可能是防卷板沒(méi)放好,冷凍切片機(jī)的溫度一般是零下10到15℃;還有可能是你的組織比較硬或者是刀片的問(wèn)題,不同組織切片機(jī)里也要不同溫度需要注意一下。
五、為什么切片總是脫片?
1、粘附劑因素在制作組織學(xué)和病理學(xué)石蠟切片時(shí),一般用甘油蛋白做粘附劑,但若甘油蛋白配制的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),蛋白質(zhì)變性,甘油蛋白的粘附作用即降低,可導(dǎo)致組織切片與載玻片粘附不牢,切片一進(jìn)入二甲苯溶液即從玻片上脫落下來(lái)。
2、溫度的影響常規(guī)石蠟切片染色,溫度一般在20-37較好。組織從二甲苯脫蠟出來(lái),立即進(jìn)入室溫的純酒精清洗,這樣組織一下從37降至4℃左右,一冷一熱,熱脹冷縮,造成組織容易從載玻片上脫落下來(lái)。
3、浸蠟時(shí)間的影響,組織取材后在脫水,浸蠟時(shí)間和包埋溫度上掌握不夠準(zhǔn)確,特別是腺體組織比較嬌嫩,稍有過(guò)頭組織就變脆,在染色過(guò)程中就很容易出現(xiàn)脫片現(xiàn)象。